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新到手的c18色譜柱不要著急使用,先做好其活化工作

更新時(shí)間:2020-08-17        閱讀:14050
  c18色譜柱具有大的孔徑,可用純水作為流動(dòng)相,因此,該色譜柱是測(cè)定和分析天然和合成多肽以及小分子蛋白質(zhì)的理想色譜柱。特殊化學(xué)鍵合技術(shù)形成單層ODS,在純水溶液中不會(huì)崩解。
 

  c18色譜柱的活化:
  由于色譜柱由生產(chǎn)廠家實(shí)驗(yàn)室測(cè)試完畢密封好后到達(dá)您的手中可能經(jīng)過(guò)了一段時(shí)間,因此必須對(duì)您剛拿到手的柱子進(jìn)行活化處理:首先,配好65%C2H3N/水或者CH3OH溶劑備用,所有進(jìn)入HPLC儀器的溶劑必須經(jīng)過(guò)0.2um或者0.45um過(guò)濾膜過(guò)濾并脫氣;再按柱子的正確方向連接柱子進(jìn)口端(連接時(shí)注意一定要把管路的端口抵緊柱子的進(jìn)口以免產(chǎn)生死空間發(fā)生漩渦效應(yīng)降低柱效), 出口端先不接檢測(cè)器。先以0.1~-0.2ml/min的流速?zèng)_洗,等看到有液體從柱子中流出后,持續(xù)10mins之后再接上檢測(cè)器,以循序漸進(jìn)方式將流速調(diào)至1.0ml/min(LC/MS柱子應(yīng)以0.2ml/min的流速進(jìn)行),繼續(xù)活化2小時(shí)。
 
  c18色譜柱硅膠填料:
  c18色譜柱采用球形, 高純度(金屬雜質(zhì)<10 ppm)硅膠為填料,孔徑120?,粒徑有1.8、2.2、3、5和10 μm,孔體積1.0 mL/g,比表面積350 m2/g,單層全封尾,碳載量19.5%。c18色譜柱特別為各種堿性化合物的分離而設(shè)計(jì),pH耐受范圍1.5-10.5;
  硅膠:球形,高純度(金屬雜質(zhì)<10ppm)孔徑:120? 粒徑:1.8、2.2、3、5和10μm;
  孔體積:1.0mL/g 比表面積:350m2/g 固定相結(jié)構(gòu):?jiǎn)螌尤馕?碳載量:19.5%。

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